Thrombomodulin humano TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Thrombomodulin humano, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit For Research Use

Thrombomodulin humano, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Materiais fornecidos com o jogo

Princípio

Este jogo de ELISA usa o sanduíche-ELISA como o método. O stripplate de Microelisa fornecido neste jogo foi pré-revestido com um anticorpo específico ao thrombomodulin. Os padrões ou as amostras são adicionados aos poços apropriados do stripplate de Microelisa e combinaram ao anticorpo específico. Então uma peroxidase do armorácio (HRP) - anticorpo conjugado específico para o thrombomodulin é adicionada a cada stripplate de Microelisa bem e incubada. Os componentes livres são lavados afastado. A solução da carcaça de TMB é adicionada a cada poço. Somente aqueles poços que contêm o thrombomodulin e o HRP conjugaram o anticorpo do thrombomodulin parecerão azuis na cor e girarão então amarelo após a adição da solução da parada. A densidade ótica (OD) é medida spectrophotometrically em um comprimento de onda de 450 nanômetro. O valor do OD é proporcional à concentração de thrombomodulin. Você pode calcular a concentração de thrombomodulin nas amostras comparando o OD das amostras à curva padrão.

Preparação da amostra

1. preparação do soro

Após a coleção do sangue inteiro, permita que o sangue coagule deixando o imperturbado na temperatura ambiente. Isto toma geralmente 10-20 minutos. Remova o coágulo centrifugando em 2,000-3,000 RPM por 20 minutos. Se precipita aparece durante a reserva, a amostra deve ser centrifugated outra vez.

2. preparação do plasma

Recolha o sangue inteiro nos tubos com anticoagulante (o EDTA ou citrato). Após incubado na temperatura ambiente por 10-20 minutos, os tubos centrifugated para o minuto 20 em 2,000-3,000 RPM. Recolha o supernatant com cuidado como amostras do plasma. Se precipita aparece durante a reserva, a amostra deve ser centrifugated outra vez.

3. Amostras de urina

Recolha a urina nos tubos assépticos. Recolha o supernatant com cuidado após a centrifugação para o minuto 20 em 2,000-3,000 RPM. Se precipita aparece durante a reserva, a amostra deve ser centrifugated outra vez. O procedimento da preparação do líquido cerebrospinal e do líquido pleuroperitoneal é o mesmo que aquele da amostra de urina.

4. Amostras da pilha

Se você quer detectar as secreções das pilhas, recolha o supernatant da cultura nos tubos assépticos. Recolha o supernatant com cuidado após a centrifugação para o minuto 20 em 2,000-3,000 RPM. Se você quer detectar componentes intracelulares, dilua as pilhas a 1X106/ml com o PBS (pH 7.2-7.4). As pilhas foram destruídas para liberar componentes intracelulares pela congelação repetida e thawing. Recolha o supernatant com cuidado após a centrifugação para o minuto 20 em 2,000-3,000 RPM. Se precipita aparece durante a reserva, a amostra deve ser centrifugated outra vez.

5. amostras de tecido

As amostras de tecido são cortadas, pesadas, congeladas no nitrogênio líquido e armazenadas em -80℃ para uso futuro. As amostras de tecido foram homogeneizadas após ter adicionado PBS (pH 7,4). As amostras devem ser operadas em 4℃. Recolha o supernatant com cuidado após a centrifugação para o minuto 20 em 2,000-3,000 RPM. Parte alíquota o supernatant para o ensaio de ELISA e o uso futuro.

Notas:

• A extração da amostra e o ensaio de ELISA devem ser executados o mais cedo possível após a coleção da amostra. As amostras devem ser extraídas de acordo com a literatura relevante. Se o ensaio de ELISA não pode ser executado imediatamente, as amostras podem ser armazenadas em ciclos da gelo-aproximação amigável de -20℃.Repeated devem ser evitadas.
• Nossos jogos não podem ser usados para amostras com NaN3 que pode inibir a atividade de HRP.