Anti vírus humano da imunodeficiência do VIH 1&2 Elisa Test Kit For Human

3. PROCEDIMENTO DE ENSAIO

• Permita que todos os componentes alcancem a temperatura ambiente antes de usar. 1:20 concentrado Dilute do amortecedor da lavagem com o ddH2O.
• Ajustado dois três os negativos controles do positivo e. Dispense 100μl do controle positivo (HIV-1 e HIV-2) assim como do controle negativo em duplicado em poços respectivos sem diluente da amostra. Ajustado uma placa bem como o controle do fundo sem adicionar algum líquido. Adicione 50μl do diluente da amostra em cada teste bem, adicione o soro do teste de 50 μl ou o plasma em poços do teste mistura completamente.
• Coloque a placa de microtiter em uma caixa humedecida e incube-a em 37°C para 30 mínimos.
• Rejeite a solução da reação e adicione o amortecedor diluído 350μl da lavagem a cada poço. Rejeite o amortecedor da lavagem após embeber para 15-30seconds. Repita de lavagem 5 vezes e então inversão da placa o procedimento vigorosamente para obter para fora toda a água e obstrução da borda dos poços no papel absorvente por alguns segundos.
• Adicione 100μl do conjugado da enzima a cada poço. Misture-o delicadamente rodando a placa de microtiter no banco liso para 1 mínimo. Não adicione o conjugado da enzima ao poço vazio.
• Coloque a placa de microtiter em uma caixa humedecida e incube-a em 37°C para 30 mínimos.
• Lave cada um bem 5 vezes enchendo cada poço com o amortecedor diluído da lavagem 1X, a seguir invertendo a placa vigorosamente para obter para fora toda a água e obstruindo a borda dos poços no papel absorvente por alguns segundos.
• Adicione 50μl da solução A da carcaça (carcaça de HRP) a cada poço, a seguir adicione 50μl da solução B da carcaça (TMB) a cada poço. Misture delicadamente e incube em 37°C for15 mínimo.
• Adicione uma gota (50μl) da solução da parada a cada poço para parar a reação de cor.
• Leia o valor do OD em 450 nm/630 nanômetro com o leitor duplo da placa de filtro. É opção para ler o valor do OD em 450 nanômetro com o único leitor da placa de filtro. (usando o valor do OD do poço vazio para corrigir toda a leitura do OD de todos os poços