PCes do jogo 96 do teste da hormona de tira de teste ISO13485 do LH de Elisa Luteinizing

LH Elisa Kit Luteinizing Hormone

1. Uso pretendido

Immunoassay para in vitro a determinação quantitativa da hormona luteinizing no soro humano.

2. Sumário

• O LH (hormona luteinizing), junto com FSH (hormona de estimulação do folículo), pertence à família da gonadotropina. O LH e FSH regulam e para estimular synergistically o crescimento e a função das gônada (ovário e testículos). Como FSH, TSH e o hCG, LH são uma glicoproteína que consiste em duas subunidades (α- e β-correntes). (1, 2, 3) este proteohormone, que consiste em 121 ácidos aminados e em três correntes do açúcar, tem um peso molecular de 29500 daltons. Nas mulheres, as gonadotropinas atuam dentro do circuito de regulamento do hipotálamo-pituitário-ovário para controlar o ciclo menstrual.
• O LH e FSH são liberados nos pulsos das pilhas gonadotrópicas do pituitário anterior e da passagem através da circulação sanguínea aos ovário. Aqui as gonadotropinas estimulam o crescimento e a maturação do folículo e daqui da biosíntese das hormonas estrogênicas e das progesteronas. As LH-concentrações as mais altas ocorrem durante o pico do meados de-ciclo e induzem a ovulação e a formação do luteum do corpus, o produto principal da secreção de que é a progesterona. Nas pilhas de Leydig dos testículos, o LH estimula a produção de testosterona. A determinação da concentração do LH é usada na elucidação das deficiências orgânicas dentro do sistema das hipotálamo-pituitário-gônada. A determinação do LH conjuntamente com FSH é utilizada para as seguintes indicações: doenças congenitais com aberrações de cromossoma (por exemplo a síndrome de Turner), os ovário polycystic (PCO), esclarecendo as causas do amenorrhea, a síndrome menopáusica, e a insuficiência suspeitada da pilha de Leydig. (1, 4, 5)

3. Princípio do teste

Princípio do sanduíche. Duração total do ensaio: 80 minutos.

• A amostra, Anti-LH revestiu microwells e o Anti-LH etiquetado enzima é combinado.

• Durante a incubação, o LH apresenta na amostra é reservado reagir

simultaneamente com os dois anticorpos, tendo por resultado as moléculas do LH que são

imprensado entre a fase contínua e os anticorpos enzima-ligados.

• Após a lavagem, um complexo é gerado entre a fase contínua, o LH dentro da amostra e anticorpos enzima-ligados por reações imunológicas.

• A solução da carcaça então é adicionada e catalisada por este complexo, tendo por resultado uma reação cromogénea. A reação cromogénea resultante é medida como a absorvência.

• A absorvência é proporcional à quantidade de LH na amostra.

Reagentes

Materiais fornecidos

• Microplate revestido, 8 X12 tiras, 96 poços, pré-revestidos com o rato monoclonal

Anti-LH.

• Calibradores, 6 tubos de ensaio, 1 ml cada um, prontos para uso; Concentrações: 0 (A), 5 (B), 20 (C), 50 (D), 100 (E) e 200 (F) mIU/mL.

• O conjugado da enzima, 1 tubo de ensaio, 11 mL de HRP (peroxidase do armorácio) etiquetou o rato Anti-LH monoclonal no amortecedor Tris-NaCl que contém BSA (albumina de soro bovino). Contém 0,1% preservativos ProClin300.

• Carcaça, 1 tubo de ensaio, 11ml, pronto para uso, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Pare a solução, 1 tubo de ensaio, 6,0 ml de 1 mol/L de ácido sulfúrico.

• Concentrado da solução da lavagem, 1 tubo de ensaio, 25 mL (40X se concentrou), PBS-Tween

solução da lavagem.

• IFU, 1 cópia.

• Tampa da placa: 1 parte.

Materiais exigidos (mas não fornecido)

• Leitor de Microplate com capacidade absorvente do comprimento de onda 450nm e 620nm.

• Arruela de Microplate.

• Incubadora

4. Procedimento de teste

• Use somente o número de poços exigidos e formate os poços dos microplates para

cada calibrador e amostra a ser analisados.

• Adicione o μL 25 dos calibradores ou das amostras a cada poço.

• Adicione o μL 100 do conjugado da enzima a cada poço.

• Agite o microplate delicadamente por 30 segundos para misturar.

• Cubra a placa com uma tampa da placa e incube-a no °C 37 por 60 minutos.

• Rejeite os índices da micro placa pela decantação ou pela aspiração. Se

decantando, bata e borre o seco de placa com papel absorvente.

• Adicione o μL 350 da solução da lavagem, decante-o (torneira e mancha) ou aspire-o. Repita 4 vezes adicionais para um total de 5 lavagens. Uma arruela automatizada da tira do microplate pode ser usada. No fim da lavagem, inverta a placa e bata para fora toda a solução residual da lavagem no papel absorvente.

• Adicione o μL 100 da carcaça a cada poço.

• Incube na temperatura ambiental (18-25℃) na obscuridade para a reação por 20 minutos. Não agite a placa após a adição do substate.

• Adicione o μl 50 da solução da parada a cada poço.

• Agite por 15-20 segundos para misturar o líquido dentro dos poços. É importante para

assegure-se de que as mudanças azuis da cor para amarelar completamente.

• Leia a absorvência de cada poço em 450 nanômetro (que usam 620 a 630 nanômetro como

comprimento de onda da referência para minimizar imperfeições boas) em um micro leitor da placa.