Método Murine de Kit Mouse Interferon Gamma Sandwich do teste da gama RUO de Ifn

Γ da interferona do rato; Gama da interferona; IFN-γ; IFN-gama; IFNG; ELISA Kit

Para in vitro a determinação quantitativa de concentrações do γ da interferona (IFN-γ) no soro do rato, no plasma, nos meios de cultura ou em algum líquido biológico.

Princípio

Este jogo de ELISA usa o sanduíche-ELISA como o método. O stripplate de Microelisa fornecido neste jogo foi pré-revestido com um anticorpo específico a IFN-γ. Os padrões ou as amostras são adicionados aos poços apropriados do stripplate de Microelisa e combinaram ao anticorpo específico. Então uma peroxidase do armorácio (HRP) - anticorpo conjugado específico para IFN-γ é adicionada a cada stripplate de Microelisa bem e incubada. Os componentes livres são lavados afastado. A solução da carcaça de TMB é adicionada a cada poço. Somente aqueles poços que contêm IFN-γ e o anticorpo conjugado HRP de IFN-γ parecerão azuis na cor e girarão então amarelo após a adição da solução da parada. A densidade ótica (OD) é medida spectrophotometrically em um comprimento de onda de 450 nanômetro. O valor do OD é proporcional à concentração de IFN-γ. Você pode calcular a concentração de IFN-γ nas amostras comparando o OD das amostras à curva padrão.

Materiais fornecidos com o jogo

• Diluição dos padrões

Dez poços são ajustados para padrões em um stripplate de Microelisa. Em bem 1 e bem em 2, a solução 100μl padrão e o amortecedor padrão da diluição 50μl são adicionados e misturados bem. Em bem 3 e bem em 4, a solução 100μl de bem 1 e 2 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. a solução 50μl é rejeitada do poço 3 e bem 4. Em bem 5 e bem em 6, a solução 50μl de bem 3 e 4 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 7 e bem em 8, a solução 50μl de bem 5 e 6 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. Em bem 9 e bem em 10, a solução 50μl de bem 7 e 8 é adicionada bem respectivamente. Então o amortecedor padrão da diluição 50μl é adicionado e misturado bem. a solução 50μl é rejeitada do poço 9 e bem 10. Após a diluição, o volume total em todos os poços é 50μl e as concentrações são 180 pg/ml, 120pg/ml, 60 pg/ml, 30pg/ml e 15 pg/ml, respectivamente.

Cálculo de resultados

As concentrações conhecidas do padrão de IFN-γ do rato e de sua leitura correspondente OD são traçadas na escala do log (x-linha central) e na escala do log (y-linha central) respectivamente. A concentração de rato IFN-γ na amostra é determinada pelo traço o O.D. da amostra na Y-linha central. A concentração original é calculada multiplicando o fator da diluição.

Precisão

precisão do Intra-ensaio (precisão dentro de um ensaio): 3 amostras com o baixo, rato médio e de nível elevado IFN-γ foram testadas 20 vezes em uma placa, respectivamente.

precisão do Inter-ensaio (precisão entre ensaios): 3 amostras com o baixo, rato médio e de nível elevado IFN-γ foram testadas em 3 placas diferentes, 8 replicates em cada placa.

CV (%) = SD/meanX100

Intra-ensaio: CV<10>

Inter-ensaio: CV<12>

Escala do ensaio

3pg/ml-200 pg/ml

Sensibilidade:

0.8pg/ml