RUO HBcAb Kit Elisa

O teste RUO HBcAb ELISA destina- se à detecção qualitativa de anticorpos contra o antígeno do núcleo do vírus da hepatite B no soro/ plasma humano.

Como parte da família Hepadnaviridae, o VHB é um vírus de ADN envolto e de dupla cadeia que é a principal causa de transmissão da hepatite através do sangue.Os efeitos da infecção pelo VHB variam de hepatite leve a grave, que inclui problemas hepáticos crónicos, tais como carcinoma e cirrose.Os marcadores sorológicos devem ser identificados durante as três fases da infecção - incubação.O principal componente do vírus é o antígeno do núcleo da hepatite B (HBcAg).Este antígeno do núcleo é composto por um único polipeptídeo de aproximadamente 17kD que é descarregado na desagregação das partículas do núcleo. Pelo menos um determinante imunológico está presente no antígeno. Logo após o início da HBsAg, os anticorpos contra HBcAg (anticorpo total e IgM anti-HBc) aparecem e nunca desaparecem.,a infecção por hepatite B pode ser contraída sem anti- HBc imunologicamente detectável.O rastreamento para anti-HBc produz dados sobre a prevalência da hepatite B em várias populaçõesA identificação de anti-HBc é vital quando diagnosticada em um ambiente clínico.Juntamente com outros testes de hepatite B, o marcador anti- HBc permite um diagnóstico correto e um controlo adequado da progressão do vírus.O anti-HBc pode ser possivelmente o único indicador de uma infecção por hepatite B (incluindo outros testes de doentes com HBsAg negativo).

Materiais e componentes

MICROPLATO:As tiras de micro-buracos em branco são fixadas em um suporte de fita branca. A placa é selada em uma bolsa de alumínio com desicante. Cada poço contém HBcAg purificado. As tiras de micro-buracos podem ser quebradas para serem usadas separadamente.Colocar poços ou tiras não utilizados no saco de plástico de armazenamento fechável fornecido juntamente com o dessecante e devolver a 2-8°CUma vez aberto, estável durante um mês a 2- 8°C.

Controle negativo:(1x1, 0 ml por frasco para injectáveis) conservantes.00, 1% ProClinTM 300 Líquido amarelado preenchido num frasco para injectáveis com tampa de parafuso verde. tampão estabilizado por proteínas testado não reativo para HBcAb. pronto para utilização conforme fornecido. Uma vez aberto, estável durante um mês a 2- 8°C.

Controle positivo:(1x1, 0 ml por frasco para injectáveis) conservantes.00, 1% ProClinTM 300 Líquido de cor vermelha preenchido num frasco para injectáveis com tampa de parafuso vermelha. HBcAb diluído em tampão estabilizado com proteínas. Pronto para utilização conforme fornecido. Uma vez aberto, estável durante um mês a 2- 8°C.

CONJUGADO:(1x6 ml por frasco para injectáveis) conservante.00, 1% ProClinTM 300 Líquido de cor vermelha num frasco para injectáveis branco com tampa de parafuso vermelha.estável durante um mês a 2-8°C.

Capa de limpeza:(1x20 ml por frasco) DILUIR ANTES DA USO! detergente Tween-20 líquido incolor preenchido num frasco branco com tampa de parafuso branca.PH 7.4, 20 × PBS O concentrado deve ser diluído1 a 19Uma vez diluído, estável durante uma semana à temperatura ambiente ou durante duas semanas quando conservado a 2-8°C.

Substrato A:(1x6 ml por frasco para injectáveis) Líquido incolor preenchido num frasco para injectáveis branco com tampa de parafuso verde.

Substrato B:(1x6 ml por frasco para injectáveis) Líquido incolor preenchido num frasco para injectáveis preto com tampa de parafuso preto.

STOP SOLUÇÃO:(1x6 ml por frasco para injectáveis) Líquido incolor num frasco para injectáveis branco com tampa de parafuso branca.₂SO₄) Pronto para utilização conforme fornecido.

Saco de plástico selável:Para acoplar as tiras não utilizadas 1 unidade

INSERTAÇÃO DO PACO1 cópia

COVERAÇÃO de placa de cartão2 folhas

Para cobrir as placas durante a incubação e evitar a evaporação ou a contaminação dos poços.

Procedimento

Preparar reagentes:Deixar os reagentes atingirem a temperatura ambiente (18-30°C).Utilizar água destilada ou desionizada e apenas recipientes limpos para diluir o tampãoTodos os outros reagentes são:Prontos para uso conforme fornecidos.

1. Preparação:Formate os poços das microplacas para análise da amostra de controlo e do doente, coloque todas as tiras de micro-bolhas não utilizadas de volta na tampa do saco de alumínio e conserve-as a 2-8°C.
2. Adição de Amostra:Adicionar 50 μl do controlo ou das amostras ao poço designado.
3. Adicionar conjugado:Adicionar 50 μl deCONJUGADOEm todos os poços, exceto no Blank.
4. Incubação:Cobrir a placa com a tampa da placa e incubar por 30 Minutosa 37°C.
5. Lavagem:No final da incubação, retirar e descartar a tampa da placa. Lavar cada poço 5 vezes com Wash Buffer diluído.Após o último ciclo de lavagem, abaixe a placa sobre papel de borracha ou toalha limpa e toque nela para remover quaisquer resíduos.
6. Adição de substrato:Adicionar 50 μl de solução de substrato A e 50 μl de solução de substrato B em cada poço.10 minutos.a 37°C, evitando a luz.
7. Adicionando Solução de Paragem:Utilizando uma pipeta multicanal ou manualmente, adicionar50μEu...de Stop Solution em cada poço e misturar suavemente.
8. Medir a absorção:Calibrar o leitor de placas com o poço em branco e ler a absorvência a450 nmSe for utilizado um instrumento de filtro duplo, fixar o comprimento de onda de referência em630 nmCalcular o valor de corte e avaliar os resultados. (Nota:Leia a absorvência no10 minutos.após a interrupção da reação).