Kit de ensaio TNF-α Elisa humano

UTILIZAÇÃO Destinada

Este kit é utilizado para a determinação das concentrações de TNF-α em supernatados de cultura de células humanas.

Procedimento de avaliação

1- Diluir e adicionar amostra:Diluir densidade original Padrão conforme a tabela inferior: 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2. adicionar amostra: Colocar separadamente os poços em branco (os poços de comparação em branco não adicionam amostra e reagente HRP-Conjugate, senão cada etapa é a mesma).Adicionar 50 μl de pó padrão à estripla de MicroelisaAdicionar 40 μl de amostra diluída à amostra de ensaio, adicionar 10 μl de amostra de ensaio (a amostra final é 5 vezes diluída), adicionar amostra à amostra, não tocar a superfície da amostra tanto quanto possível e misturar suavemente.

3.Incubar: Após fechar a placa com a membrana da placa de fechamento, incubar durante 30 min a 37°C.

4.Configurar líquido: 30 (ou 20) vezes solução de lavagem diluída 30 (ou 20) vezes com água destilada e reserva.

5Lavar: Descobrir a membrana da placa de fechamento, descartar o líquido, secar por balanço, adicionar tampão de lavagem a cada poço, ficar por 30 segundos, depois drenar, repetir 5 vezes, secar por batida.

6. adicionar enzima: adicionar 50 μl de reagente HRP-conjugado a cada recipiente, excepto recipiente em branco.

7.Incubação: Operação com 3.

8. lavagem: operação com 5.

9.color: Adicionar solução de cromogénio A 50ul e solução de cromogénio B 50ul a cada bem, evitar a preservação da luz durante 10 min a 37°C

10.Parar a reacção: adicionar solução de parada50μl a cada bem, parar a reacção ((a cor azul muda para amarelo).

11. ensaio: tomar em branco o valor de zero, ler a absorvência a 450 nm após a adição da solução stop e no prazo de 15 min.

Requisitos em matéria de amostras

1. extrair o mais rapidamente possível após a recolha das amostras, de acordo com a literatura pertinente, e deve ser experimentado o mais rapidamente possível após a extracção.1 espécime pode ser mantido a 20 °C para preservarEvite ciclos de congelamento- descongelamento repetidos.

2Não é possível detectar a amostra que contém NaN3, porque NaN3 inibe o HRP ativo.

Notas importantes

1. O kit deve ser retirado do ambiente refrigerado e equilibrado durante 15 a 30 minutos à temperatura ambiente, as placas ELISA revestidas se não tiverem esgotado após a abertura,A placa deve ser armazenada num saco selado.

2. lavagem tampão wil separação de cristalização, pode ser aquecido a água ajuda a dissolver quando diluído. lavagem não afeta o resultado.

3. adicionar amostra com amostrador Cada passo, e revisar a sua precisão com frequência, evita o erro experimental. adicionar amostra dentro de 5 min, se o número de amostra é muito, recomendo usar Voley.

4Se o teor de material de ensaio for excessivamente elevado (a D.O. da amostra é maior do que o primeiro valor normal), diluir a amostra (n vezes), diluir e multiplicar pelo factor de diluição.(×n×5).

5A membrana da placa de fecho limita apenas o uso descartável, para evitar a contaminação cruzada.

6O substrato evita a preservação da luz.

7. Por favor, de acordo com as instruções de utilização estritamente, A determinação do resultado do teste deve tomar o leitor de placa microtiter como padrão.

8As amostras, o tampão de lavagem e cada tipo de rejeito devem ser tomados de acordo com o processo do material infeccioso.

9Não misture reagentes com os de outros lotes.