KIT DE TESTE ELISA DE Irisina Humana

USO PRETENDIDO

Este kit permite a determinação das concentrações de Irisina em soro humano, plasma e outros fluidos biológicos

Procedimento do ensaio

1. Diluir e adicionar amostra: Diluir o padrão de densidade original conforme a tabela a seguir:

2. Adicionar amostra: Definir poços em branco separadamente (os poços de comparação em branco não adicionam amostra e reagente HRP-Conjugado, outras operações em cada etapa são as mesmas). Poço de amostra de teste. Adicionar 50μl do padrão à placa de tira Microelisa, adicionar 40μl de diluição da amostra ao poço da amostra de teste e, em seguida, adicionar 10μl da amostra de teste (a diluição final da amostra é de 5 vezes), adicionar amostra aos poços, não tocar na parede do poço o máximo possível e misturar suavemente.

3. Incubar: Após fechar a placa com a membrana da placa de fechamento, incubar por 30 minutos a 37℃.

4. Configurar líquido: Solução de lavagem 30 vezes (ou 20 vezes) diluída 30 vezes (ou 20 vezes) com água destilada e reservar.

5. Lavagem: Descobrir a membrana da placa de fechamento, descartar o líquido, secar por oscilação, adicionar tampão de lavagem a cada poço, ainda por 30 segundos e, em seguida, drenar, repetir 5 vezes, secar por toque.

6. Adicionar enzima: Adicionar 50μl de reagente HRP-Conjugado a cada poço, exceto o poço em branco.

7. Incubar: Operação com 3.

8. Lavagem: Operação com 5.

9. Cor: Adicionar 50ul de Solução Cromogênica A e 50ul de Solução Cromogênica B a cada poço, evitar a preservação da luz por 10 minutos a 37℃

10. Parar a reação: Adicionar 50μl de Solução de Parada a cada poço, Parar a reação (a cor azul muda para a cor amarela).

11. Ensaio: Pegar o poço em branco como zero, Ler a absorbância a 450nm após Adicionar a Solução de Parada e em 15 minutos.

Requisitos da amostra

1. Extrair o mais rápido possível após a coleta da amostra e, de acordo com a literatura relevante, e deve ser experimentado o mais rápido possível após a extração. Se não for possível, a amostra pode ser mantida a -20℃ para preservar, Evitar ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

2, Não é possível detectar a amostra que contém NaN3, porque NaN3 inibe a atividade da HRP.

3. Extrair o mais rápido possível após a coleta da amostra e, de acordo com a literatura relevante, e deve ser experimentado o mais rápido possível após a extração. Se não for possível, a amostra pode ser mantida a -20℃ para preservar, Evitar ciclos repetidos de congelamento e descongelamento.

4. Não é possível detectar a amostra que contém NaN3, porque NaN3 inibe a atividade da HRP.

Notas importantes

• O kit retirado do ambiente de refrigeração deve ser equilibrado por 15-30 minutos à temperatura ambiente, as placas ELISA revestidas, se não forem utilizadas após a abertura, a placa deve ser armazenada em saco selado.
• O tampão de lavagem terá separação por cristalização, pode ser aquecido na água para ajudar a dissolver quando diluído. A lavagem não afeta o resultado.
• Adicionar amostra com amostrador a cada etapa e verificar sua precisão com frequência, evita o erro experimental. Adicionar amostra em 5 minutos, se o número de amostras for grande, recomenda-se usar Volley.
• Se o conteúdo do material de teste for excessivamente alto (a OD da amostra for maior que o primeiro poço padrão), dilua a amostra (n vezes), por favor, dilua e multiplique pelo fator de diluição. (×n×5).
• A membrana da placa de fechamento limita apenas o uso descartável, para evitar a contaminação cruzada.
• O substrato evita a preservação da luz.
• Por favor, siga as instruções de uso estritamente, a determinação do resultado do teste deve tomar o leitor de microplacas como padrão.
• Todas as amostras, tampão de lavagem e cada tipo de rejeito devem ser processados de acordo com o material infeccioso.
• Não misture reagentes com os de outros lotes.