Nome do Produto
Kit de Detecção de RT-PCR em Tempo Real para Vírus Chikungunya (CHIKV)
Uso Pretendido
Para a in vitro detecção qualitativa de RNA do vírus Chikungunya em amostras de soro, plasma ou sangue total humano. Projetado para diagnóstico clínico, vigilância e investigações de surtos de febre Chikungunya.
Parâmetros Técnicos:
| Nome do Produto: |
Kit de RT-PCR em Tempo Real para Chikungunya |
| Formato: |
Kit |
| Tipo de Teste: |
ELISA |
| Aplicações: |
Diagnóstico Médico |
| Amostra: |
Soro 50μl |
| Tamanho do Kit: |
96 Testes |
| Sensibilidade: |
Alta |
| Especificidade: |
Alta |
| Temperatura de Armazenamento: |
2-8°C |
| Validade: |
18 Meses
|
Princípio do Teste
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RT-PCR em Tempo Real: Alvos regiões conservadas do genoma CHIKV (por exemplo, E1, nsP1, ou nsP4 genes) usando primers específicos para a sequência e sondas fluorescentes (por exemplo, FAM-marcado).
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Capacidade Multiplex: Pode incluir um Controle Interno (CI) (por exemplo, RNase P) para monitorar a extração e amplificação do RNA, reduzindo resultados falso-negativos.
Componentes do Kit
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Mistura Mestra de RT-PCR: Contém transcriptase reversa, polimerase de DNA Taq, dNTPs e tampões otimizados.
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Mistura de Primer/Sonda: Oligonucleotídeos específicos para CHIKV com sondas fluorescentes (por exemplo, FAM para CHIKV, HEX/VIC para CI).
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Controles:
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Controle Positivo: RNA CHIKV inativado ou controle sintético.
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Controle Negativo: Água livre de nuclease ou matriz humana negativa.
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Controle Interno (se incluído).
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Outros Reagentes: Água livre de DNase/RNase, tubos de reação (se aplicável).
Fluxo de Trabalho
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Preparação da Amostra: Extração de RNA viral (compatível com a maioria dos kits de extração, por exemplo, QIAamp, MagMAX).
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Configuração da PCR: Misture o RNA extraído com a mistura mestre e os primers/sondas.
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Amplificação:
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Transcrição Reversa: 50°C por 10–15 min.
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Ativação da PCR: 95°C por 2–5 min.
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Ciclagem: 40–45 ciclos de 95°C (10 seg) → 60°C (30–60 seg, leitura de fluorescência).
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Análise: Valores do ciclo limiar (Ct) determinados pelo software do instrumento.
Características de Desempenho
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Sensibilidade: ≤100 cópias/mL (95% LOD).
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Especificidade: Sem reatividade cruzada com Dengue, Zika, Febre Amarela ou outros arbovírus.
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Tempo de Resposta: ~2 horas (pós-extração).
USO PRETENDIDO
O Kit de RT-PCR em Tempo Real para Chikungunya é um teste de amplificação de ácido nucleico
in vitro
para detecção qualitativa do RNA do vírus Chikungunya
no material biológico (swab, plasma sanguíneo, soro, urina) usando
detecção de hibridização-fluorescência em tempo real de produtos amplificados.
O kit de PCR é usado para estudar o material biológico, retirado de
pessoas suspeitas de infecção por Chikungunya, sem distinção de forma
e presença de manifestação.
RESUMO
O vírus Chikungunya (CHIKV) é um vírus transmitido por mosquitos (arbovírus)
primeiro
encontrado durante um surto no sul da Tanzânia em 1952. Sua
rota de transmissão vem principalmente de mosquitos infectados do gênero Aedes
gênero, em particular Ae. aegypti e Ae. Albopictus, mesmo que a transmissão vertical
perinatal tenha sido descrita também. Desde 1952, CHIKV
causou inúmeros surtos e epidemias na África, Ásia, Europa, no
Pacífico Sul e Américas, envolvendo milhões de pessoas e muitas vezes
separados por períodos de mais de 10 anos.
Após a picada de um mosquito infectado, os sintomas da doença ocorrem
geralmente entre 4 e 8 dias, mas podem variar de 2 a 12 dias.
A infecção por Chikungunya é caracterizada por um início abrupto de calafrios,
febre atingindo até 40 °C, vômitos, náuseas, dor de cabeça, artralgia
(dor nas articulações) e, em alguns casos, erupção maculopapular. Dor intensa nas articulações e
dor muscular também é observada e é o principal e o mais
sintoma problemático da doença chikungunya. A dor é tão intensa
que dificulta muito o movimento e prostra os pacientes.
O diagnóstico laboratorial é geralmente feito testando soro ou plasma
para detectar vírus, ácido nucleico viral ou imunoglobulina (Ig) específica para o vírus
M e anticorpos neutralizantes. A cultura viral pode detectar o vírus nos primeiros
3 dias de doença; no entanto, o vírus chikungunya deve ser manuseado sob
condições de nível de biossegurança (BSL) 3. Durante os primeiros 8 dias de doença,
o RNA viral chikungunya pode ser frequentemente identificado no soro. Chikungunya
os anticorpos virais normalmente se desenvolvem em direção ao final da primeira semana de
doença.
Portanto, para descartar definitivamente o diagnóstico,
amostras da fase de convalescença devem ser obtidas de pacientes cujas
amostras da fase aguda testam negativo.
Devido à reatividade cruzada dos anticorpos Chikungunya com outros
arbovírus, o uso da sorologia é limitado e controverso, então o Real
Tempo RT-PCR é um método de detecção melhor.
MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS, MAS NÃO FORNECIDOS
1. Os instrumentos de PCR compatíveis:
YS-qPCR-1 ou SLAN-96P
ou sistema ABI 7500 RT-PCR.
2. Mini centrífuga com rotor para tubos de centrífuga.
3. Mini centrífuga com rotor para tubos de PCR.
4. Tubos de centrífuga livres de nuclease.
5. Tubos e tampas de PCR livres de nuclease.
6. Pipetadores ajustáveis e ponteiras de pipeta filtradas para manuseio de DNA.
7. Suportes para tubos.
8. Luvas descartáveis sem pó.
9. Cabine biológica.
10. Geladeira e freezer.
11. Recipiente de resíduos de risco biológico.
ARMAZENAMENTO E DATA DE EXPIRAÇÃO
1. O kit deve ser armazenado a -20℃±5℃.
2. Validade: 12 meses. Não use após a data de validade.
3. A data de produção e a data de validade são mostradas no
embalagem externa.
PERGUNTAS FREQUENTES:
P: Qual é o nome da marca do Kit de Teste Elisa?
R: O nome da marca do Kit de Teste Elisa é Biovantion.
P: Qual é o número do modelo do Kit de Teste Elisa?
R: O número do modelo do Kit de Teste Elisa é BVTE159.
P: Onde o Kit de Teste Elisa é fabricado?
R: O Kit de Teste Elisa é fabricado na China.
P: O Kit de Teste Elisa possui alguma certificação?
R: Sim, o Kit de Teste Elisa é certificado com ISO13485.
P: Qual é a quantidade mínima de pedido para o Kit de Teste Elisa?
R: A quantidade mínima de pedido para o Kit de Teste Elisa é 10.
P: Qual é o preço do Kit de Teste Elisa?
R: O preço do Kit de Teste Elisa é negociável.
P: Como o Kit de Teste Elisa é embalado?
R: O Kit de Teste Elisa é embalado em uma caixa de papelão.
P: Qual é o tempo de entrega do Kit de Teste Elisa?
R: O tempo de entrega do Kit de Teste Elisa é de 7 a 15 dias.
P: Quais são os termos de pagamento para o Kit de Teste Elisa?
R: Os termos de pagamento para o Kit de Teste Elisa são TT 100% de pagamento.
P: Qual é a capacidade de fornecimento para o Kit de Teste Elisa?
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