Espécime de EBV-VCA IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma

EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog No.: BE501A
Immunoassay da enzima para a detecção de anticorpo de IgA ao antígeno viral do capsid (VCA) do vírus de Epstein-Barr (EBV).
 
1. PRINCÍPIO DO ENSAIO
O EBV-VCA IgA Ab ELISA Kit utiliza um sistema de detecção onde os poços do microplate sejam revestidos com o antígeno de recombinação que corresponde a um segmento altamente antigênico EBV-VCA. Os espécimes do soro ou do plasma, controles são adicionados aos poços. Durante a incubação, os anticorpos de IgA específicos para o presente de EBV-VCA no espécime ligarão ao antígeno de recombinação fixado nos poços do microplate. Os poços são lavados para remover os materiais desatados, e o conjugado anti-humano da peroxidase de IgA ligará ao complexo do antígeno-anticorpo e os conjugado desatados adicionais da enzima são removidos outra vez lavando. A carcaça da enzima, tetramethylbenzidine (TMB), é adicionada em cima da incubação que a carcaça hydrolyzed pela enzima encadernada e uma cor azul ou azul esverdeado torna-se nos poços que contêm anticorpos de EBV-VCA IgA. A reação de enzima é parada pela adição de ácido sulfúrico. A intensidade da cor desenvolvida é lida spectrophotometrically em 450nm (450 nm/630 nanômetro) e sida proporcional à quantidade de anticorpos atuais no espécime.
REAGENTES
 
2. Materiais fornecidos com os jogos:

 
3. PROCEDIMENTO DE ENSAIO

1. Traga ELISA Kit (todos os reagentes), e espécimes à temperatura ambiente antes de usar (aproximadamente 30 minutos).
2. 1:19 concentrado Dilute do amortecedor da lavagem com o ddH2O. Por exemplo, 5 ml do concentrado do amortecedor da lavagem devem ser diluídos a um volume total de 100 mL com deionized ou água destilada.
3. Para cada teste, placa do grupo um bem como o controle do fundo, dois controles positivos e três negativos. Dispense o controle 100ml positivo e a duplicata negativa do controle em poços individuais. Nem as amostras nem o HRP-conjugado devem ser adicionados na placa bem.
4. Dispense 100ml da diluição da amostra em poços do teste individual exceto os controles.
5. Adicione 10ml de cada amostra do teste nos poços do teste; redemoinho a misturar.
6. Incube por 30 minutos em 37°C
7. Lave cada um bem 5 vezes enchendo cada poço com o amortecedor diluído da lavagem, a seguir invertendo a placa vigorosamente para obter para fora toda a água e obstruindo a borda dos poços no papel absorvente por alguns segundos.
8. Adicione 100ml do conjugado da enzima a cada poço. Misture-o delicadamente rodando a placa de microtiter no banco liso pelos minutos 1. Não adicione o conjugado da enzima à placa bem.
9. Incube por 20 minutos em 37°C
10. Lave a placa 5 vezes como etapa 7.
11. Adicione uma gota (50ml) da solução A da carcaça (HRP-carcaça) a cada poço, a seguir adicione uma gota (50ml) da solução B da carcaça (TMB) a cada poço. Misture delicadamente e incube em 37°C por 30 minutos.
12. Adicione uma gota (50ml) da solução da parada a cada poço para parar a reação de cor. Leia o valor do OD em 450 nm/630 nanômetro com o leitor duplo da placa de filtro. É opção para ler o valor do OD em 450 nanômetro com o único leitor da placa de filtro. (usando o valor do OD do poço vazio para corrigir toda a leitura do OD de todos os poços)