Kit de ensaio ELISA da vitamina D 25-OH

UTILIZAÇÃO Destinada

Kit de detecção de vitamina D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA). É utilizado em testes quantitativos de vitamina D no soro humano.

RESUMO E SIGNIFICANÇA Clínica

A vitamina D é um precursor hormonal lipossolúvel que é produzido principalmente na pele pela exposição à luz solar.O nosso corpo só pode sintetizar vitamina D3A vitamina D2 é absorvida com alimentos enriquecidos ou administrada através de suplementos.a vitamina D3 e a vitamina D2 ligam-se à proteína de ligação à vitamina D (VDBP) no plasma e são transportadas para o fígado para se tornarem 25- hidroxi- vitamina D (25-OH- vitamina D)Uma vez que a vitamina D 25-OH é a principal forma de armazenamento, a sua concentração sanguínea é utilizada para avaliar o estado geral da vitamina D. Mais de 95% da vitamina D 25-OH, mensurável no soro,A vitamina D3 é 25-OH, enquanto a vitamina D2 25-OH só atinge níveis mensuráveis em doentes que tomam suplementos de vitamina D2.. A vitamina D é essencial para a saúde dos ossos. Nas crianças, a deficiência grave leva ao raquitismo. Nos idosos, o risco de queda foi atribuído à deficiência de vitamina D devido à fraqueza muscular.,As concentrações baixas de vitamina D 25-OH estão associadas a uma menor densidade mineral óssea. A insuficiência também tem sido associada a diabetes, câncer, doenças cardiovasculares e doenças autoimunes.Ambos os suplementos alimentares de vitamina D que estão actualmente disponíveis no mercado (vitamina D2 e vitamina D3) são convertidos em vitamina D 25-OH no fígadoA soma das concentrações de vitamina D2 25-OH e vitamina D3 25-OH no soro ou no plasma é denominada “Vitamina D25-OH total”.A monitorização precisa do nível total de vitamina D 25-OH é crítica em ambientes clínicos.. Vitamin D deficient patients who are prescribed a daily Vitamin D supplement should regularly monitor their serum or plasma Vitamin D levels in order to reach an optimal level and prevent their 25-OH Vitamin D concentrations from reaching excessive levels that are considered toxicO ensaio total de vitamina D utiliza anticorpos especiais para capturar tanto a 25- hidroxivitamina D3 como a D2.Este ensaio destina- se à determinação quantitativa da vitamina D 25-OH total no soro e no plasma humanos., como auxílio na avaliação da suficiência de vitamina D.

Princípio

O kit de ensaio quantitativo de vitamina D 25-OH baseia-se num ensaio de imunossorbente ligado a enzimas na fase sólida.O sistema de ensaio utiliza um anticorpo para imobilização na fase sólida (poços de microtiter) e outro anticorpo monoclonal nas soluções.O terceiro anticorpo que reconhece o segundo anticorpo conjugado com uma enzima (peroxidase do rabanete).são adicionados padrões e amostras de ensaio (soro) aos poços de microtiter revestidos com anticorpos de vitamina D 25-OH, incubação 30 minutos juntamente com o segundo anticorpo. Após a lavagem, o terceiro anticorpo rotulado com peroxidase de rábano picante (conjugado) é adicionado. Se a vitamina D 25-OH humana estiver presente na amostra,combinar-se-á com o anticorpo no poço e com o conjugado enzimático, resultando na formação de sanduíches entre a fase sólida e os anticorpos ligados à enzima.Os poços são lavados com água para remover os anticorpos marcados não ligadosUma solução de TMB é adicionada e incubada durante 20 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor azul.A cor é alterada para amarelo e medida espectrofotometricamente a 450 nmAs concentrações de vitamina D são directamente proporcionais à intensidade de cor da amostra de ensaio.

Reagentes fornecidos

Microplacas revestidas: 1 placa (8×12 poços), pronta para utilização. placa de microtiter monoclonal anti- 25- OH vitamina D revestida com anticorpos e selada num saco de alumínio.Retirar as tiras do saco recolocável com um dessecante para proteger da umidade após a abertura. Conservar a 2 a 8°C até à data de validade.

HRP conjugado:1 frasco para injectáveis de 22 ml, pronto para utilização.

Calibrador:6 frascos para injectáveis de 0,2 ml, rotulados com S0 a S5 e a concentração de PRL é de 0, 10, 20, 50,100, 150 ng/ ml. Armazenar a 2 a 8°C até à data de validade.

Controle:2 frascos para injectáveis de 0,2 ml.

Diluente de amostra de vitamina D:1 frasco para injectáveis de 22 ml, pronto para utilização.

Substrato TMB:1 frasco para injectáveis de 12 ml, pronto para utilização.

Parar Solução:1 frasco para injectáveis de 12 ml, pronto para utilização.

Reserva de lavagem:1 frasco para injectáveis de 15 ml, Concentrar 50 vezes, diluir com água desionizada antes do ensaio.

Fecho de chapa:Duas peças.

Saco de plástico recolocável:Um conjunto.

Manual de instruções:1 cópia.

Preparações

1. Deixar todas as amostras e reagentes atingirem a temperatura ambiente (~ 25°C) e misturar cuidadosamente por inversão suave antes da utilização.

2.Preparar o tampão de lavagem diluindo o concentrado de lavagem 20 vezes com água desionizada. A solução de lavagem diluída é estável à temperatura ambiente durante pelo menos uma semana.

PRECAÇÕES PARA USUÁRIOS

1Para cada espécime, utilizar apenas pipetas com pontas descartáveis.

2.Não misture materiais de lotes principais diferentes.Não use componentes do kit após a data de validade.

3Todos os materiais devem ser colocados à temperatura ambiente antes de serem utilizados.