Kit de ensaio ELISA da vitamina D 25-OH

UTILIZAÇÃO Destinada

Kit de detecção de vitamina D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA). É utilizado em testes quantitativos de vitamina D no soro humano.

RESUMO E SIGNIFICANÇA Clínica

 A vitamina D é um precursor hormonal lipossolúvel que é produzido principalmente através da exposição da pele à luz solar.Os nossos corpos só podem sintetizar vitamina D3A vitamina D2 pode ser ingerida através de alimentos fortificados ou suplementos.as vitaminas D3 e D2 ligam- se à proteína de ligação à vitamina D (VDBP) no plasma e são transportadas para o fígado para se tornarem 25- hidroxivitamina D (25- OH vitamina D)Uma vez que a vitamina D 25-OH é a principal forma de armazenamento, a sua concentração no sangue pode ser utilizada para avaliar o estado geral da vitamina D. Mais de 95% da vitamina D 25-OH mensurável no soro é a vitamina D3 25-OH,A vitamina D2 é essencial para a saúde óssea, enquanto a vitamina D2 25-OH só atinge níveis mensuráveis em pacientes que tomam suplementos de vitamina D2.Em idosos, o risco de quedas foi atribuído à deficiência de vitamina D devido à fraqueza muscular.A insuficiência de vitamina D também tem sido associada ao diabetesOs dois suplementos alimentares de vitamina D actualmente no mercado (vitamina D2 e vitamina D3) são convertidos em vitamina D 25-OH no fígado.A soma das concentrações de vitamina D2 25-OH e de vitamina D3 25-OH no soro ou no plasma é denominada "total de vitamina D 25-OH"." Em ambientes clínicos, o monitoramento preciso dos níveis totais de vitamina D 25-OH é crítico. Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicO ensaio total de vitamina D utiliza anticorpos específicos para capturar as 25-hidroxivitaminas D3 e D2.O ensaio é concebido para medir quantitativamente a vitamina D 25-OH total no soro humano e no plasma, para ajudar na avaliação da vitaminaD suficiência.

Princípio

O kit de ensaio quantitativo de vitamina D 25-OH baseia-se num ensaio de imunossorbente ligado a enzimas na fase sólida.O sistema de ensaio utiliza um anticorpo para imobilização na fase sólida (poços de microtiter) e outro anticorpo monoclonal nas soluções.O terceiro anticorpo que reconhece o segundo anticorpo conjugado com uma enzima (peroxidase do rabanete).são adicionados padrões e amostras de ensaio (soro) aos poços de microtiter revestidos com anticorpos de vitamina D 25-OH, incubação 30 minutos juntamente com o segundo anticorpo. Após a lavagem, o terceiro anticorpo rotulado com peroxidase de rábano picante (conjugado) é adicionado. Se a vitamina D 25-OH humana estiver presente na amostra,combinar-se-á com o anticorpo no poço e com o conjugado enzimático, resultando na formação de sanduíches entre a fase sólida e os anticorpos ligados à enzima.Os poços são lavados com água para remover os anticorpos marcados não ligadosUma solução de TMB é adicionada e incubada durante 20 minutos, resultando no desenvolvimento de uma cor azul.A cor é alterada para amarelo e medida espectrofotometricamente a 450 nmAs concentrações de vitamina D são directamente proporcionais à intensidade de cor da amostra de ensaio.

Preparações

1. Deixar todas as amostras e reagentes atingirem a temperatura ambiente (~ 25°C) e misturar cuidadosamente por inversão suave antes da utilização.

2.Preparar o tampão de lavagem diluindo o concentrado de lavagem 20 vezes com água desionizada. A solução diluída é estável à temperatura ambiente durante pelo menos uma semana.

PRECAÇÕES PARA USUÁRIOS

1Para cada espécime, utilizar apenas pipetas com pontas descartáveis.

2.Não misture materiais de lotes principais diferentes.Não use componentes do kit após a data de validade.

3Todos os materiais devem ser colocados à temperatura ambiente antes de serem utilizados.