Anticorpo ao vírus da hepatite B Antígeno do núcleo (HBcAb)

ELISA TEstK- Não.

Apenas para uso profissional e de diagnóstico in vitro.

NOME DO PRODUTO

Kit de ensaio ELISA anti-HBc (sério/plasma)

UTILIZAÇÃO Destinada

Este kit de ensaio ELISA anti- HBc é uma detecção qualitativa de anticorpos contra o antígeno do núcleo do vírus da hepatite B (HBcAb) no soro/ plasma humano.O reagente é adequado para o rastreio clínico e diagnóstico da infecção pelo vírus da hepatite B no soro/plasma humano..

PRINCÍPIO DE TEST

O vírus da hepatite B (HBV) é um envelope,vírus de ADN de cadeia dupla pertencente à família Hepadnaviridae e reconhecido como a principal causa da hepatite transmissível pelo sangue, juntamente com o vírus da hepatite C (VHC)A infecção pelo VHB induz um espectro de manifestações clínicas que vão desde doenças leves e não aparentes até hepatites fulminadas, doenças hepáticas crônicas graves,que, em alguns casos, podem levar a cirrose e carcinoma do fígadoA classificação de uma infecção por hepatite B requer a identificação de vários marcadores sorológicos expressos durante três fases (incubação, aguda e convalescente) da infecção.

O principal componente do vírus é o antígeno do núcleo da hepatite B (HBcAg).Este antígeno do núcleo é composto por um único polipeptídeo de aproximadamente 17kD que é descarregado na desagregação das partículas do núcleoPelo menos um determinante imunológico está presente no antígeno.

Pouco tempo após o início da HBsAg, os anticorpos contra a HBcAg (anticorpo total anti-HBc e IgM) aparecem e nunca desaparecem.a infecção por hepatite B pode ser contraída sem anti-HBc imunologicamente detectávelO diagnóstico da hepatite B em pacientes com doença hepática é feito por meio de um teste de detecção da hepatite B em pacientes com doença hepática.crônicaA identificação de anti-HBc é vital quando se faz o diagnóstico em um ambiente clínico.o marcador anti-HBc permite um diagnóstico correto e um acompanhamento adequado do progresso do vírusO anti- HBc pode ser possivelmente o único indicador de uma infecção por hepatite B (incluindo outros testes de doentes com HBsAg negativo).

O sistema do ensaio HBcAb ELISA baseia-se no princípio competitivo da incubação de fase sólida em uma única etapa.Compete com o anti-HBc monoclonal conjugado com a peroxidase do rabanete (HRP-Conjugado) por uma quantidade fixa de HBcAg purificado pré-revestido na microplacaSe não houver anti-HBc presente, o anti-HBc HRP-conjugado será ligado junto com os antígenos dentro dos poços.Após a adição de soluções de cromogénio A e B aos poços e durante a incubaçãoA presença de anticorpos contra o HBcAg na amostra é indicada por uma cor baixa.ou nenhuma cor presente.

Requisitos para a amostra

1.Coleção de espécimes:Não é necessária uma preparação especial do paciente. A amostra deve ser recolhida de acordo com a prática normal de laboratório. Podem ser utilizadas amostras de soro/plasma frescos para este ensaio.O sangue recolhido por punção venosa deve ser deixado coagular de forma natural e completa. O soro deve ser separado do coágulo o mais cedo possível para evitar a hemólise dos glóbulos vermelhos.Deve ser tomado cuidado para assegurar que as amostras de soro/ plasma sejam transparentes e não contaminadas por micro-organismos.

2.HNão devem ser utilizados amostras com lipemia, icterícia ou hemolíticas graves. utilizadasComo podem dar resultados falsos no ensaio.Não inative o calor Espécimes- As amostras com contaminação microbiana visível nunca devem ser utilizadas.

3. O HBcAb ELISA destina- se unicamente ao ensaio de amostras individuais de soro/ plasma. Não utilizar o ensaio para o ensaio de amostras de cadáveres, saliva, urina ou outros fluidos corporais, ou sangue combinado (misturado).

4Transportar e armazenar: conservar amostras a 2-8°C. As amostras que não sejam necessárias para análise no prazo de 3 dias devem ser armazenadas congeladas (-20°C ou menos).Para transporte, as amostras devem ser embaladas e rotuladas em conformidade com as regulamentações locais e internacionais existentes para o transporte de amostras clínicas e agentes etológicos.

Procedimento de ensaio

1Todos os reagentes devem ser deixados a atingir a temperatura ambiente durante 15 minutos antes de serem utilizados.

2. Diluir o tampão de lavagem com uma diluição de 1:40 com água destilada antes da utilização.

3A amostra deve corresponder ao número de microplacas, cada placa deve ser dotada de 3 poços de controlo negativo, 2 poços de controlo positivo e 1 poço de controlo em branco.(Se detectado com detecção de comprimento de onda duplo, não é permitido definir nenhum poço de controlo em branco).

Nota: Utilize uma ponta separada da pipeta de eliminação para cada amostra, controlo negativo e positivo, a fim de evitar a contaminação cruzada.

4Adicionar 50 μL de amostra no poço correspondente (Quando este kit for utilizado para diagnóstico clínico auxiliar, a amostra a ser testada deve ser diluída com solução salina normal a 1:30 para análise.Quando utilizado para investigação epidemiológica, a amostra original pode ser detectada ), adicionar 50 μL de controlo negativo e controlo positivo aos poços de controlo negativo e aos poços de controlo positivo.Adicionando respectivamente o Enzima Conjugado 50μL (não adicionar no poço em branco).

5Agitar durante 30 segundos com um oscilador (esta etapa é muito importante). Incubação a 37 °C durante 30 minutos com a membrana da placa de vedação a selar a placa.

6. No final da incubação, remover e descartar a tampa da placa. Tirar, adicionar tampão de lavagem a cada poço por 20 segundos. Repita 5 vezes. Após o ciclo de lavagem final, a água é lavada com um filtro de água.Virar a placa sobre papel de borracha ou toalha limpa, e toque nele para remover quaisquer resíduos.

7. Adicionar o substrato A (50μL) e o substrato B (50μL) (não adicionar no poço em branco). Misturar suavemente agitando. Incubação a 37 °C durante 15 minutos com a membrana da placa de vedação a selar a placa.

8. Adicionar 50μL de solução de interrupção a cada poço (não adicionar no poço em branco).Calibrar o leitor de placa com o Blank bem e ler a absorvência a 450nm.Se for utilizado um instrumento de filtro duplo, definir o comprimento de onda de referência em 630 nm. Não é permitido definir poços em branco se for utilizado um comprimento de onda duplo para detectar. Calcular o valor de corte e avaliar os resultados.