KIT DE TESTE ELISA AHM

1. Princípio

O ELISA AMH é um imunoensaio quantitativo que mede o Hormônio Anti-Mülleriano (AMH) em soro ou plasma humano. Ele usa um formato ELISA sanduíche (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) com anticorpos específicos para AMH, permitindo a detecção precisa de biomarcadores da reserva ovariana.

2. Uso Pretendido

• Avaliação da reserva ovariana (potencial de fertilidade em mulheres).

• Diagnóstico da Síndrome dos Ovários Policísticos (SOP).

• Monitoramento da Tecnologia de Reprodução Assistida (TRA) (por exemplo, FIV).

• Estudos hormonais pediátricos e relacionados à menopausa.

3. Principais Características

• Alta Sensibilidade: Detecta baixos níveis de AMH (faixa típica: 0,01–24 ng/mL).

• Alta Especificidade: Reatividade cruzada mínima com hormônios relacionados (por exemplo, inibina B).

• Formato: Microplaca de 96 poços (ELISA competitivo ou sanduíche, dependendo do kit).

• Tipos de Amostra: Soro (padrão ouro) ou plasma (EDTA/heparina).

• Volume da Amostra: 20–50 µL por teste.

4. Procedimento do Ensaio

1. Preparação da Amostra: Centrifugar amostras de sangue (10 min a 1000–3000 × *g*).

2. Incubação:

   • Adicionar amostras/padrões aos poços revestidos com anticorpos.

   • Incubar (1–2 horas, TA ou 37°C).

3. Lavagem: Remover material não ligado.

4. Detecção: Adicionar anticorpo conjugado com enzima (por exemplo, HRP) → substrato (TMB).

5. Solução de Parada: Solução ácida interrompe a reação (mudança de cor).

6. Leitura: Medir a absorbância em 450 nm (referência: 620–650 nm).

5. Métricas de Desempenho

• Precisão: Taxa de recuperação 90–110% (vs. padrões WHO/NIBSC).

• Precisão: CV intra-ensaio <10%, CV inter-ensaio <12%.

• Linearidade: Recuperação de diluição 85–115%.

• Limite de Detecção (LOD): 0,01–0,1 ng/mL (dependente do kit).

6. Interpretação

• Faixa Normal:

  • Mulheres na pré-menopausa: 1,0–4,0 ng/mL.

  • Baixa reserva ovariana: <1,0 ng/mL.

  • SOP: Frequentemente >4,0 ng/mL.

• Valores de corte específicos para sexo/idade devem ser validados por laboratório.

7. Vantagens

• Estabilidade: AMH é robusto (amostra estável por 48–72 horas a 2–8°C; longo prazo a –20°C).

• Compatível com Automação: Adaptável a plataformas como DS2 (Dynex) ou ELx808 (BioTek).

8. Limitações

• Não padronizado entre os kits: Os resultados podem variar entre os fabricantes.

• Interferências: Hemólise, lipemia ou ciclos repetidos de congelamento-descongelamento.

9. Exemplos de Kits Comerciais

• "AMH Gen II ELISA" (Ansh Labs/Abbott).

• "picoAMH ELISA" (Ansh Labs, ultra-sensível).

• "Kit ELISA AMH Humano" (R&D Systems, Cat. No. DSL-10-14400).