Apenas para diagnóstico in vitro e uso profissional.
Nome
Kit de teste ELISA Anti-Ct IgG (soro/plasma)
USO PRETENDIDO
Este kit é uma detecção qualitativa de soro/plasma humano de Chlamydia trachomatis (Ct) IgG. O kit é
adequado para triagem clínica e diagnóstico de infecção por Ct em soro/plasma.
PRINCÍPIO DE TESTE
O antígeno Ct é absorvido em fase sólida pela microplaca de reação de poliestireno. Se houver anticorpo Ct IgG
na amostra de teste, ele se liga ao antígeno Ct revestido na microplaca, forma o complexo antígeno-anticorpo e então
liga-se à enzima marcada como anti-anticorpo e forma o complexo antígeno-anticorpo-anticorpo na superfície
da microplaca e exibe a cor azul no poço correspondente através da ação do substrato. Portanto, é
pode detectar especificamente o Ct IgG em soro/plasma humano.
PROCEDIMENTO DE TESTE
1. Equilibre todos os reagentes à temperatura ambiente durante 15 minutos antes da utilização.
2. Dilua o tampão de lavagem na proporção de 1:40 com água destilada antes de usar.
3. Adicione 100μL de diluente de amostra no poço correspondente (não adicione no poço branco, negativo
poços de controle e poço de controle positivo.) A amostra deve corresponder ao número de micro
placa, cada placa deve ser fornecida com controle negativo 2 poços, controle positivo 1 poço e branco
controle 1 bem. Adicione 5μL de amostra no poço correspondente, misture bem com a pipeta, adicione
50μL de controle negativo e controle positivo para poços de controle negativo e poço de controle positivo (não
adicione bem o espaço em branco).
Observação: Use uma ponta de pipeta descartável separada para cada amostra, Controle Negativo e Positivo para
evitar contaminação cruzada.
4. Agite suavemente para misturar por 30 segundos. Incubar a 37°C por 20 minutos com a membrana da placa de vedação
selando a placa.
5. No final da incubação, retire e descarte a tampa da placa. Retire, adicione tampão de lavagem
cada poço por 20 segundos. Repita 5 vezes. Após o ciclo de lavagem final, vire a placa sobre
papel absorvente ou toalha limpa e bata levemente para remover qualquer resíduo.
6. Adicionar respectivamente 50 µL de conjugado enzimático (não adicionar no poço branco)
7. Incubar a 37°C durante 20 minutos com a membrana da placa de vedação vedando a placa. Repita o
lave a etapa 5 vezes como na etapa 5.
8. Adicione 50 µL do Substrato A e 50 µL do Substrato B (não adicione no poço branco). Incubar a 37 ℃ por
10 minutos com a membrana da placa de vedação selando a placa.
9. Adicione 50 μL de solução de parada a cada poço (não adicione no poço branco). Misture suavemente agitando, leia o
absorbância dentro de 10 minutos após parar a reação. Calibre o leitor de placas com o branco
bem e leia a absorbância em 450 nm. Se um instrumento de filtro duplo for usado, defina a referência
comprimento de onda em 630 nm. Não é permitido definir nenhum poço em branco se usar comprimento de onda duplo para detectar. Calcule o
Valor de corte e avaliação dos resultados.
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
Cronometria: Leia a densidade óptica (OD) da amostra a 450 nm com um leitor de microplacas.
O valor médio de OD do controle negativo ≤ 0,1 e o valor médio de OD do controle positivo ≥ 0,8, o teste é válido,
caso contrário, o teste será inválido.
Valor de corte (CO) = O valor médio de DO do controle negativo x 3 (calculado por 0,10 quando o valor médio
O valor OD do controle negativo é <0,10, calculado pelo valor real quando o valor OD médio do controle negativo
o valor é> 0,10)
Resultados Positivos: Valor DO da amostra ≥ CO
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